Réalisation d'un Myélogramme

par t labo Ven 26 Fév 2010, 02:31

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Réalisation d'un Myélogramme

Message par t labo Ven 26 Fév 2010, 02:31

Le Myélogramme permet d'effectuer l'évaluation de l'hématopoïèse.

Réalisation

Le myelogramme se fait par aspiration du suc médullaire après avoir réalisé une ponction à l'aide d'un trocart. Cette ponction est réalisée sur le manubrium sternal ou bien en crète iliaque supéro-postérieure (notamment chez les enfants). L'aspiration doit être minimale pour ne pas provoquer de dilution. Le suc médullaire aspiré est ensuite étalé pour réaliser des frottis. Il est possible au préalable de réaspirer le sang du prélèvement pour ne réaliser les frottis qu’avec les grumeaux. Cette technique, bien que très précieuse, est hélas peu utilisée car elle peut conduire à une coagulation très rapide du prélèvement. Les frottis sont ensuite séchés puis colorés par la technique de May-Grunwald Giemsa en utilisant un tampon à pH 6.9
Définition :

C'est un examen qui consiste à prélever de la moelle osseuse par ponction et aspiration, pour pouvoir ensuite faire un frottis qui sera coloré pour être examiné au microscope.

Le prélèvement est effectué dans le but de faire :

Une Analyse morphologique au microscope photonique mais aussi pour effectuer d'autres examens complémentaires :

· Immunophénotypage des populations cellulaires médullaires

· Caryotype

· Biologie moléculaire: recherche de réarrangements de gènes

· Cultures cellulaires (Progéniteurs)

· Examens bactériologiques (recherche de BK par exemple)

Matériel de prélèvement :

· Trocarts à usage unique : différents modèles sont proposés sur le marché.

· Seringues de 20ml

· Lames de verre pour effectuer les étalements

· Tubes avec anticoagulants (EDTA /Héparine) pour les prélèvements complémentaires (cytogénétique ; biologie moléculaire ; cultures)

Lieux de prélèvement :

-Os plats (Sternum ; Os iliaque antérieur ou postérieur)
-Epiphyse des os longs (bosse tibiale, chez le petit enfant)

Méthode :

Repérage du lieu de ponction :

Le sternum, est le lieu de ponction le plus fréquemment utilisé:
au niveau du manubrium sternal, juste au-dessus de l'angle de Louis, au centre. Sur un patient en décubitus dorsal.
La ponction peut aussi être effectuée en crête iliaque postérieure, en particulier chez les enfants.
Désinfection cutanée en utilisant par exemple de l'alcool iodé. Attention on est souvent en situation de risque infectieux majeur.

L'anesthésie locale :

Elle est indispensable et peut utiliser :

· Xylocaine 1%. Son injection permet une anesthésie des plans cutanés et de la table externe du sternum.

· Pommade Emla. Elle doit être posée entre une demi-heure et une heure avant la ponction.
La ponction

Elle se fait en 4 temps :

· Le trocart traverse la peau, prend appui perpendiculairement sur le sternum puis traverse la table externe.

· Le mandrin est retiré de l'aiguille creuse

· Une seringue de 20ml est solidement adaptée à l'embout du trocart.

· L'aspiration de la moelle osseuse doit être brève car elle est douloureuse.
Le prélèvement :

1 goutte de moelle, pour examen cytologique, doit être prélevée en première intention, avec une première seringue, pour éviter une hémodilution.

L'étalement

C'est une étape importante pour une bonne analyse morphologique.

La meilleure technique d'étalement est celle des frottis :
La goutte de moelle osseuse est rejetée sur la lame de verre, et les grumeaux de moelle récupérés avec une autre lame de verre et étalés selon la technique des frottis.
Une autre technique consiste à écraser les grumeaux de moelle, pour tenter d'obtenir une meilleure concentration cellulaire; mais cette technique risque d'engendrer des artefacts gênants pour l'interprétation cytologique.

Plusieurs frottis doivent être effectués pour un même patient :
-3 lames pour les colorations standard avec la technique de May-Grunwald-Giemsa, à pH6.9
-4 ou 5 autres lames pour des éventuelles réactions cytochimiques.

Les prélèvements complémentaires

Ils seront effectués avec une autre seringue qui permettra de prélever plusieurs millilitres de moelle qui seront répartis dans des tubes contenant l'anticoagulant nécessaire à chacune de ces techniques.

Observation

L'observation du myélogramme (aprés coloration de MGG) commence toujours par l'examen des frottis au grossissement X10 afin d'en déterminer la richesse globale, et la richesse en mégacaryocytes.

Richesse

Elle se côte de 0 à 5 selon l'échelle suivante

0 = Désert (lorsque très peu d'éléments sont observables et que leur décompte reste inférieur à 100)

	1 = Pauvre (lorsque le décompte dépassera à peine 100)
	2 = Médiocre (intermédiaire entre moyen et pauvre)
	3 = Moyenne (intermédiaire entre pauvre et riche)
	4 = Riche (persistance d'espaces libres entre les cellules)
	5 = Très Riche (lorsque les cellules granuleuses se touchent)

Les Mégacaryocytes

A = Absent (nécessaire d'avoir observé le frottis en totalité)

R = Rares (2 à 3 mégas sur un frottis observé en totalité)

P = Présents

N = Nombreux (plusieurs mégas par champs en fins de frottis)

Résultats normaux du Myélogramme

Richesse : = ou >3

Mégacaryocytes : Présents

Lignée Erythroblastiques

Proérythroblaste : 0 à 2%
Erythroblaste Basophile : 2-5%
Erythroblaste Polychromatophile : 8 à 15%
Erythroblaste Acidophile : 10 à 25%

Lignée Myéloïde

Hémoblaste : 1 à 3%
Myéloblaste : 1 à 3%
Promyélocyte : 1 à 5%

Myélocyte Neutrophile : 12 à 18%
Myélocyte Eosinophile : 0 à 3%
Myélocyte Basophile : 0 à 1%

Métamyélocyte Neutrophile : 12 à 18%
Métamyélocyte Eosinophile : 0 à 3%
Métamyélocyte Basophile : 0 à 1%

Polynucléaire Neutrophile : 25 à 40%
Polynucléaire Eosinophile : 0 à 5%
Polynucléaire Basophile : 0 à 3%

Lignée Lymphoïde

Lymphoblaste : 0 à 1%
Prolymphocyte : 0 à 1%
Lymphocyte : 10 à 15%

Lignée Monocytaire

Monoblaste : 0 à 1%
Promonocyte : 0 à 1%
Monocyte : 2 à 8%

Autres

Plasmocyte : 1 à 5%