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par chim chim Jeu 27 Oct 2016, 12:53Bonjour,
J’ai un exercice à faire en enzymologie sur le calcul de l’activité enzymatique, le voilà :
Afin de déterminer l’activité d’une enzyme spectrophotométriquement en suivant l’apparition du produit à 450 nm. Pour cela, un volume de la solution enzymatique et celui du substrat sont incubés. La réaction est conduite pendant 2 min et la différence d’absorbance est estimée de 0,86.
-Calculez, en UI/ml, l’activité de l’enzyme sachant que ε P 450nm = 2100 M-1 cm-1.
L’obstacle c’est que UI s’exprime en µmol/min, l’unité demandée est UI/ml donc : µmol/min.ml. C’est facile de calculer la concentration du produit par la loi de Beer-Lambert et de la convertir en µmol/ml au lieu de mol/l (j’ai trouvé 0,41µmol.ml), mais cette activité doit être celle de l’enzyme en une minute pour avoir l’unité µmol/min.ml= UI/ml, selon les données de l’exercice la réaction a été mené pendant 2 min, on ne peut pas simplement diviser par 2 pour avoir l’activité en µmol/min.ml (car l’activité de l’enzyme en une minute n’est pas égale à la moitié de son activité en 2 min), et on ne peut pas écrire AE= 0,41 µmol/2min.ml, comment faire pour trouver l’activité en µmol/min.ml ?
J’ai un exercice à faire en enzymologie sur le calcul de l’activité enzymatique, le voilà :
Afin de déterminer l’activité d’une enzyme spectrophotométriquement en suivant l’apparition du produit à 450 nm. Pour cela, un volume de la solution enzymatique et celui du substrat sont incubés. La réaction est conduite pendant 2 min et la différence d’absorbance est estimée de 0,86.
-Calculez, en UI/ml, l’activité de l’enzyme sachant que ε P 450nm = 2100 M-1 cm-1.
L’obstacle c’est que UI s’exprime en µmol/min, l’unité demandée est UI/ml donc : µmol/min.ml. C’est facile de calculer la concentration du produit par la loi de Beer-Lambert et de la convertir en µmol/ml au lieu de mol/l (j’ai trouvé 0,41µmol.ml), mais cette activité doit être celle de l’enzyme en une minute pour avoir l’unité µmol/min.ml= UI/ml, selon les données de l’exercice la réaction a été mené pendant 2 min, on ne peut pas simplement diviser par 2 pour avoir l’activité en µmol/min.ml (car l’activité de l’enzyme en une minute n’est pas égale à la moitié de son activité en 2 min), et on ne peut pas écrire AE= 0,41 µmol/2min.ml, comment faire pour trouver l’activité en µmol/min.ml ?
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